Descrição
Aula Prática Introdução à biologia celular e do desenvolvimento é uma atividade prática da disciplina Introdução à Biologia Celular e do Desenvolvimento, identificada na fonte como Unidade 3, Aula/Seção 3.1. A atividade é ofertada por acesso on-line ao software Laboratório Algetec (acesso não pago) e deve ser realizada em computador: requisito mínimo de memória RAM de 4 GB; não é recomendada a execução em celular ou tablet. No primeiro acesso o ambiente pode abrir mais lentamente devido ao carregamento de plugins; acessos subsequentes tendem a ser mais rápidos.
O foco prático desta aula é a extração e purificação de ácidos nucleicos (DNA e RNA) em ambiente de laboratório virtual, com procedimentos que reproduzem o uso de equipamentos e materiais comuns de rotina laboratorial. São enfatizadas práticas de segurança (uso obrigatório de jaleco, luvas, máscara e óculos), manipulação de micropipetas e ponteiras, homogeneização em vórtex, incubação e análises espectrofotométricas com Nanodrop, além do emprego de kits de extração contendo tampões de lise, lavagem e eluição e enzimas como Proteinase K.
O que é desenvolvido nesta atividade
Nesta aula prática o estudante realiza a sequência operacional da extração/purificação: identificação e uso de EPIs; preparação do tubo Eppendorf com 25 μl de Proteinase K, adição de 200 μl de amostra de sangue e 200 μl do tampão de lise S; homogeneização no vórtex por 20 segundos e incubação por 15 minutos, seguindo etapas subsequentes do protocolo de kit (lavagens e eluição). Os objetivos explícitos incluem analisar as funções e finalidades de cada reagente e material do protocolo e definir cada etapa do procedimento de extração e purificação de DNA ou RNA. O roteiro também prevê operação de centrífuga de Eppendorf, tubos spin, uso de água Milli‑Q, álcool 96% e leitura de concentração/pureza no Nanodrop.
Principais conteúdos abordados
- Disciplina: Introdução à Biologia Celular e do Desenvolvimento — Unidade 3, Aula/Seção 3.1
- Software/laboratório virtual: Laboratório Algetec (acesso on-line, não pago)
- Segurança e EPIs: jaleco, luvas, máscara, óculos
- Equipamentos e materiais: micropipeta e ponteiras, vórtex, centrífuga de Eppendorf, tubos Eppendorf, tubos spin, Nanodrop
- Reagentes e kits de extração: Proteinase K, tampões de lise S, tampões de lavagem SI/SII, tampão de eluição SI
- Etapas práticas essenciais: lise (25 μl Proteinase K; 200 μl amostra; 200 μl tampão S), homogeneização (20 s), incubação (15 min), lavagens e eluição
Aula Prática Introdução à biologia celular e do desenvolvimento
Roteiro de Aula Prática
Introdução à Biologia Celular e
do Desenvolvimento
Disciplina: Introdução à Biologia Celular e do
Desenvolvimento
ROTEIRO DE AULA PRÁTICA 1
Unidade: 3
Aula (White Label)/Seção (KLS): 3.1
SOFTWARE
☐Software / ☒ Acesso on-line
☐Pago / ☒ Não Pago
Infraestrutura:
O LABORATÓRIO VIRTUAL DEVE SER ACESSADO POR COMPUTADOR. ELE NÃO DEVE
SER ACESSADO POR CELULAR OU TABLET.
O REQUISITO MÍNIMO PARA O SEU COMPUTADOR É UMA MEMÓRIA RAM DE 4 GB.
SEU PRIMEIRO ACESSO SERÁ UM POUCO MAIS LENTO, POIS ALGUNS PLUGINS SÃO
BUSCADOS NO SEU NAVEGADOR. A PARTIR DO SEGUNDO ACESSO, A VELOCIDADE DE
ABERTURA DOS EXPERIMENTOS SERÁ MAIS RÁPIDA.
1. Caso utilize o Windows 10, dê preferência ao navegador Google Chrome;
2. Caso utilize o Windows 7, dê preferência ao navegador Mozilla Firefox;
3. Feche outros programas que podem sobrecarregar o seu computador;
4. Verifique se o seu navegador está atualizado;
5. Realize teste de velocidade da internet.
Descrição do software:
Laboratório Algetec
ATIVIDADE PRÁTICA 1
Atividade proposta:
Extração e purificação de DNA e RNA
Objetivos:
Analisar as funções e as finalidades de cada reagente e/ou material descritos no protocolo de
extração e purificação de DNA ou RNA;
Definir cada etapa descrita no protocolo de extração e purificação de DNA ou RNA.
Procedimentos para a realização da atividade:
Materiais necessários:
Jaleco;
Luvas;
Máscara;
Óculos;
Centrífuga de Eppendorf; Vórtex;
Incubadora;
Tubo de coleta com amostra de sangue;
Tubo Eppendorf;
Tubo spin;
Hipoclorito de sódio;
Ponteira para micropipeta;
Micropipeta;
Nanodrop (espectrofotômetro);
Água Mili-Q;
Notebook;
Álcool 96%;
Kit de extração DNA – Tampão de lise S;
Kit de extração DNA – Tampão de lavagem SI;
Kit de extração DNA – Tampão de lavagem SII;
Kit de extração DNA – Tampão de eluição SI;
Kit de extração DNA – Proteinase K tipo L;
Kit de extração DNA – Tampão de proteinase.
PROCEDIMENTO
1. Segurança do experimento
Coloque os equipamentos de proteção individual localizados no “Armário de EPIs”.
Visualize a pia clicando com o botão esquerdo do mouse na câmera com o nome “Pia”
localizada dentro do painel de visualização no canto superior esquerdo da tela. Se preferir,
também pode ser utilizado o atalho do teclado “Alt+1”.
Abra a torneira clicando com o botão esquerdo do mouse sobre a pia.
Abra o armário de EPI clicando com o botão esquerdo do mouse sobre as portas.
Selecione os EPIs necessários para a realização do ensaio clicando com o botão esquerdo
do mouse sobre eles. Nesse experimento, é obrigatório o uso de jaleco, luvas máscaras e
óculos.
Feche as portas do armário de EPIs clicando com o botão esquerdo do mouse sobre elas.
2. Etapa da Lise
Nesta etapa, você deverá pipetar 25 μl da Proteinase K no tubo Eppendorf. Em seguida,
pipetar 200 μl da amostra de sangue no mesmo tubo, e por último, pipetar 200 μl do tampão
lise S no tubo. Tampe o Eppendorf e homogeneíze no Vórtex por 20 segundos. Após esse
tempo, incube o Eppendorf por 15 min.
Para isto, siga as etapas ilustradas a seguir:
Visualize a bancada clicando com o botão esquerdo do mouse na câmera com o nome
“Bancada” ou através do atalho do teclado “Alt+3”.
Ajuste o volume da pipeta clicando com o botão direito do mouse sobre a mesma e, em
seguida, selecione “Reajustar volume”.
Mude o volume da pipeta clicando com o botão esquerdo do mouse sobre o box no canto
inferior esquerdo digite o volume e, em seguida, clique em “OK”.
Posicione a pipeta no tubo de Proteinase K clicando com o botão direito do mouse sobre a
mesma e, em seguida, selecione “Colocar em Proteinase K”.
Posicione a pipeta no tubo Eppendorf clicando com o botão direito do mouse sobre a
mesma e, em seguida, selecione “Colocar em Eppendorf”.
Troque a ponteira da pipeta clicando com o botão direito do mouse sobre a mesma e, em
seguida, selecione “Trocar ponteira”.
Ajuste o volume da pipeta clicando com o botão direito do mouse sobre a mesma e, em
seguida, selecione “Reajustar volume”.
Mude o volume da pipeta clicando com o botão esquerdo do mouse sobre o box no canto
inferior esquerdo, em seguida, clique em “OK”.
Posicione a pipeta no tubo com a amostra de sangue clicando com o botão direito do
mouse sobre a mesma e, em seguida, selecione “Colocar em Amostra de sangue”.
Posicione a pipeta no tubo Eppendorf clicando com o botão direito do mouse sobre a
mesma e, em seguida, selecione “Colocar em Eppendorf”.
Troque a ponteira da pipeta clicando com o botão direito do mouse sobre a mesma e, em
seguida, selecione “Trocar ponteira”.
Posicione a pipeta no tampão de lise S clicando com o botão direito do mouse sobre a
mesma e, em seguida, selecione “Colocar em Tampão de lise S”.
Posicione a pipeta no tubo Eppendorf clicando com o botão direito do mouse sobre a
mesma e, em seguida, selecione “Colocar em Eppendorf”.
Troque a ponteira da pipeta clicando com o botão direito do mouse sobre a mesma e, em
seguida, selecione “Trocar ponteira”.
Aula Prática Introdução à biologia
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